動(dòng)物繁殖學(xué)(animal reproduction)是研究動(dòng)物生殖活動(dòng)及其調(diào)控規(guī)律和調(diào)控技術(shù)的科學(xué)，是加強(qiáng)畜禽品種改良、保證畜牧業(yè)快速發(fā)展的重要手段，是現(xiàn)代動(dòng)物科學(xué)或畜牧科學(xué)中研究最活躍的學(xué)科之一; 下面是小編帶來的有關(guān)動(dòng)物繁殖學(xué)實(shí)驗(yàn)心得，希望大家喜歡
本次繁殖學(xué)實(shí)習(xí)的地點(diǎn)是在作為我們專業(yè)的一個(gè)實(shí)習(xí)基地的奶牛場進(jìn)行的。實(shí)習(xí)的目是觀察母牛生殖器官的外部結(jié)構(gòu)，并且對牛進(jìn)行直腸檢查。所謂直腸檢查是指檢查人員將手臂從牛的肛門伸入直至直腸里面去靠觸覺來感受母牛的子宮口、卵巢等部位器官的情況是否正常。
5月27日早晨8點(diǎn)，本專業(yè)的學(xué)生在老師的帶領(lǐng)下驅(qū)車前往奶牛場，此奶牛場建立比較偏僻的地方，離人口集中的住宅區(qū)較遠(yuǎn)，交通便利，不但不會(huì)妨礙周邊群眾的生活，而且牛場各個(gè)工作場所都很有規(guī)律的進(jìn)行著養(yǎng)殖生產(chǎn)。周邊寬闊的空地種植著很多奶牛喜愛的牧草，提高環(huán)境利用率，降低了生產(chǎn)成本。
這個(gè)牛場的養(yǎng)殖規(guī)模雖然不大，但管理方面比較規(guī)范，畜舍為開放式畜舍，切每欄每頭牛都有各自的編號(hào)，大小牛分區(qū)飼養(yǎng)，有專人在牛舍里專門負(fù)責(zé)牛糞的沖洗等工作，通風(fēng)降溫等設(shè)備也比較齊全。唯一欠缺的是衛(wèi)生問題，進(jìn)入牛場之后，牛糞濃烈的味道環(huán)繞在鼻間持久不散，某些地方由于過多的蒼蠅讓人渴望而不可及，相比之下，員工休息辦公區(qū)域相對較好。
我們這次來奶牛場的重要所在是完成實(shí)習(xí)的目的安排，每一個(gè)人都親手體驗(yàn)一下奶牛內(nèi)部的體溫。在老師帶領(lǐng)下自由參觀一段時(shí)間之后，奶牛場廠長開始給我們講解奶牛發(fā)情時(shí)候的外部行為表現(xiàn)以及體內(nèi)體表的主要特征變化，并且介紹了一些人工受精和擠奶的常識(shí)。
處于發(fā)情期的奶牛一般情況下都有一定的發(fā)情表現(xiàn)，常常爬跨其它奶牛，或接受其它奶牛的爬跨，處于發(fā)情期的奶牛其臀部常常會(huì)有被爬跨過的痕跡;同時(shí)也會(huì)伴隨著奶牛大聲哞叫，敏感燥動(dòng)，尋找其他發(fā)情母牛，采食量減少，產(chǎn)奶量下降，活動(dòng)量增加，主動(dòng)嗅聞其他母牛外陰并用嘴與之摩擦，尾根高抬。處于發(fā)情中期的奶牛會(huì)從陰部分泌出長條狀黏稠而透明的黏液，呈玻璃棒狀。發(fā)情期的奶牛的身體變化：外陰黏膜和陰蒂隨發(fā)情期的時(shí)間推移變得潮濕，漸漸充血腫脹，顏色由淺紅變?yōu)樯罴t，至發(fā)情后期，其腫脹程度又漸漸消退，顏色由深紅變?yōu)闇\紅。發(fā)情大約后二天可見陰道出血。這個(gè)征候可幫助確定漏配的發(fā)情牛，為跟蹤下次發(fā)情日期或調(diào)整情期提供依據(jù)。
廠長在做了進(jìn)一步的各種知識(shí)的初步講解后與老師配合將一根粗大的有機(jī)玻璃管插入母牛的陰道內(nèi)露出其內(nèi)部環(huán)境，并用電筒照明講解。眾同學(xué)圍觀觀察后發(fā)現(xiàn)牛陰道到子宮頸口之間的距離比較長，陰道壁光滑，子宮頸口呈輻射狀皺褶。
接下來便直切主題：親身體驗(yàn)牛的直腸檢查方法，動(dòng)手實(shí)干。
廠長告知直腸檢查時(shí)為了檢查人員的安全，有些注意事項(xiàng)：
1、手臂如有傷口，不應(yīng)操作，有條件時(shí)應(yīng)提供長臂手套后，再進(jìn)行直腸檢查;
2、保定架的后兩柱之間不可架設(shè)橫木或拴系繩索，以免?；古P下時(shí)，導(dǎo)致檢查人員手臂骨折或關(guān)節(jié)脫臼;
3、檢查過程中，時(shí)刻提防牛蹴踢;
4、每次直腸檢查操作完畢后，要用消毒劑洗滌消毒手臂，并涂以皮膚滋潤保護(hù)劑，以免皮膚糙裂。
檢查前，還要求將剪短指甲，防止劃傷奶牛直腸，將手臂清洗消毒后涂上起潤滑作用的液體石蠟。然后站在牛的正后方，給牛的肛門周圍涂上滑潤劑并親親撫摸牛的肛門，使牛安靜。將拇指放于掌心，四指并攏集，稍旋轉(zhuǎn)前伸從奶牛肛門插入直腸。進(jìn)入直腸之后，剛開始沒有能第一時(shí)間找到子宮頸，并且手臂還有被奶牛放出的氣體推出來的感覺，但是在廠長的幫忙下，手臂伸進(jìn)去則是感受到一種吸力，擠壓著我的手臂，在廠長的細(xì)心講解和親手帶領(lǐng)下，手感覺經(jīng)過一個(gè)岔口，并且向下延伸就輕易地感受到了子宮頸，摸起來類似一個(gè)很粗的膠皮管道，富有彈性。在場長手把手地細(xì)心引導(dǎo)下，我還順利的摸到了卵巢等器官。手臂進(jìn)入直腸后要更加仔細(xì)，嚴(yán)防粗暴。檢查時(shí)動(dòng)作要輕、快、準(zhǔn)確，檢查順序是摸到子宮頸，然后沿著子宮頸觸摸子宮角、卵巢，然后是子宮中動(dòng)脈。廠長說，手臂伸入肛門后，直腸內(nèi)如有宿糞，可用手指擴(kuò)張肛門，使空氣由手指縫進(jìn)入直腸內(nèi)，促使宿糞排出。不過我不是前幾位伸手插入奶牛肛門的同學(xué)，這個(gè)任務(wù)由幾個(gè)率先伸手插入奶牛肛門進(jìn)行檢查的同學(xué)完成，而我的手拖出后只粘上了及其少量的糞便，只是有一種很濃的類似胃酸的難聞且難忘的味道?？墒窃趯?shí)習(xí)的最后還是發(fā)現(xiàn)有同學(xué)在檢查時(shí)不小心弄破了奶牛的直腸，這對奶牛的傷害是比較大的，希望那頭奶牛直腸傷口早些愈合。一頭奶牛的肛門被這么幾十號(hào)人的手插了又插，辛苦了。
在等待完所有同學(xué)都將手伸進(jìn)奶牛的直腸進(jìn)行體驗(yàn)并且把手臂各種清洗干凈之后，大家合影留戀，并且在老師的帶領(lǐng)下集合返校，本次實(shí)習(xí)由此宣告圓滿結(jié)束。
實(shí)習(xí)總結(jié)：果然只有實(shí)踐才能檢驗(yàn)自己所學(xué)的東西能否被活用。通過實(shí)習(xí)和自己的切身體驗(yàn)，更進(jìn)一步的了解并掌握奶牛直腸檢查的方法，加深了對奶牛生殖器官的認(rèn)識(shí)，增進(jìn)了對課本知識(shí)在實(shí)踐中如何運(yùn)用的理解，并且從一個(gè)新的層面了解了畜牧這個(gè)行業(yè)。
一、實(shí)習(xí)目的
掌握種畜精液品質(zhì)檢查方法，熟悉檢查程序，學(xué)會(huì)藥品的配制方法，為以后從事畜牧生產(chǎn)打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
二、藥品和儀器
藥品：氯化鈉、苯胺黑、伊紅、氯胺T、美藍(lán)(甲基藍(lán))、乙醚、無水乙醇、95%乙醇、復(fù)紅、苯酚(石炭酸)、氫氧化鉀、蘇木精硫酸鋁鉀、冰醋酸、二水磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、40%福爾馬林液、十二水磷酸氫二鈉、甲醛、碳酸鎂、Giemsa原料、甘油、甲醇、香柏油、蒸餾水。
儀器：小試管、50ml容量瓶、100ml容量瓶、500ml容量瓶、1000ml容量瓶、試管架、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、水浴恒溫箱、溫度計(jì)、量筒、膠頭滴管、大燒杯、小燒杯、染色用玻璃板、醫(yī)用膠帶、鑷子、酒精燈、毛細(xì)玻璃管、pH試紙、移液槍(1ml、10ul)、電子天平、稱量紙、藥品勺、濾紙、漏斗、標(biāo)簽紙、玻璃棒、移液管、血細(xì)胞計(jì)數(shù)器、紗布、藥棉、研缽。
三、試劑配制
3%氯化鈉溶液：稱取30g氯化鈉，在燒杯中溶解并定容于1000ml容量瓶中。
1%氯化鈉溶液：稱取10g氯化鈉，在燒杯中溶解并定容于1000ml容量瓶中。
0.9%氯化鈉溶液：稱取9g氯化鈉，在燒杯中容解并定容于1000ml容量瓶中。
5%伊紅溶液：取2.5g的伊紅(曙紅)，用蒸餾水配制成50ml的伊紅溶液。
1%苯胺黑溶液：取0.5苯胺黑(阿尼林黑、精元)，用蒸餾水配制50ml的苯胺黑溶液。
0.1mg/ml美蘭溶液： 取美蘭100mg，溶解于100ml的1%的NaCl溶液中，置于容量瓶中3d，再用1%氯化鈉溶液稀釋10倍備用。
復(fù)紅原液：稱取10g復(fù)紅(品紅)溶于100ml 95%的酒精中。
5%石炭酸溶液：稱取5g苯酚溶于100ml 蒸餾水。
飽和伊紅酒精溶液：量取60ml 95%酒精于燒杯中，加入伊紅不斷攪拌，直至伊紅不再溶解為止。
復(fù)紅染色液：取復(fù)紅原液10ml、5%石炭酸溶液100ml相互混合，然后再加入飽和伊紅酒精溶液50ml 混合，放置兩周后即可使用。
美藍(lán)溶液：取1g美藍(lán)溶于100ml 95%酒精中。
0.01%氫氧化鉀溶液：取0.1g氫氧化鉀用蒸餾水定容至1000ml。
美藍(lán)染色液：取美藍(lán)溶液30ml、0.01氫氧化鉀溶液100ml混合，然后過濾并加入3倍量的蒸餾水，混合后即可使用。
0.5%氯胺T：取氯胺T0.5g溶于100ml蒸餾水中。
蘇木精溶液：蘇木精2g、冰醋酸10ml、甘油100ml、95%酒精100ml、蒸餾水100ml、硫酸鋁鉀5g。
1.將蘇木精溶于少量酒精中，加冰醋酸后攪拌。
2.加入甘油及其余酒精。
3.研碎鉀礬溶于水并加溫。
4.將其一滴滴加入染色劑中，并不斷攪動(dòng)。
5.瓶口用雙層紗布包扎，放于通風(fēng)處，并經(jīng)常搖動(dòng)，顏色變?yōu)樽仙珪r(shí)方可使用。如
果加入0.2g碘酸鉀即刻成熟。
使用時(shí)，原液：50%酒精和等量冰醋酸混合液為1:1混合。
伊紅染液：取1g伊紅溶于100ml 95%酒精中，染色時(shí)，取一定量的該液加入等量70%的酒精。
福爾馬林緩沖液：將21.82 g Na2HP04·2H20和22.25 g KH2P04分別溶于500 ml蒸餾水中，然后取 200 ml Na2HP04 加80 ml KH2PO4配成緩沖液。再取該緩沖液100 ml加入62.5 ml 40%(v/v)福爾馬林溶液，最后加蒸餾水至500 ml。
磷酸鹽緩沖液：取Na2HPO4·12H2O 2.2 g、NaH2PO4·2H2O 0.55 g，先用少量蒸餾水溶解，再用蒸餾水定容至100 ml。配制后用pH試紙測pH值，應(yīng)為7.0～7.2。
福爾馬林磷酸鹽固定液
1.Na2HPO4·12H2O 2.25g、NaH2PO4·2H2O 0.55g置于100 ml燒杯中，加入0.89%NaCl溶液約30 ml，使之溶解。
2.加入甲醛MgCO3飽和液8ml。
甲醛MgCO3飽和液配制方法：在500 ml福爾馬林(40%甲醛)中加入8 g MgCO3。此飽和液必須在一周前配好。
3.用0.89%NaCl溶液少許沖洗裝過甲醛的量筒置于容量瓶中，并定容至100 ml。此液配好后，第二天即可用。一般在室溫下保存，其pH 為7.0～7.2。
Giemsa原液：按1 gGiemsa原料：66 ml甘油：66ml甲醇的比例配制。將Giemsa染料置于研缽中，先加入少量溫?zé)?60℃)的甘油，充分研磨至無顆粒呈漿糊狀。再將剩余甘油全部倒入，置56℃恒溫箱中保溫2小時(shí)。分次用甲醇清洗容器于棕色瓶中保存。保持一個(gè)月后才能使用。此原液放置時(shí)間越長越好，但使用前需經(jīng)過濾。
Giemsa染液(必須在染色前配制)：按Giemsa原液 : 磷酸緩沖液 : 蒸餾水的比例為2 : 3 : 5的比例配制。
四、實(shí)習(xí)內(nèi)容
(一)肉眼觀察
豬精液稀薄，灰白色，無云霧狀現(xiàn)象。
(二)精子密度的檢查及活率評(píng)分
評(píng)定精子的活率在25℃下(在37℃保溫箱內(nèi)或加熱在舞臺(tái)最佳)，用玻璃棒取一
滴原精液或稀釋精液滴在載玻片上，蓋上蓋玻片，其內(nèi)無氣泡、充滿精液，在油鏡下，暗視野中觀察。
備注：稀釋時(shí)，用等溫的0.9%NaCl溶液稀釋;標(biāo)準(zhǔn)是直線運(yùn)動(dòng)精子的比例。
(三)死活精子百分率的測定
1.方法 各取5ml的5%伊紅和1%苯胺黑按1:1混勻，分裝于1—2ml的容量試管中，約為容量的1/2，在37℃水浴，隨后加1—3滴原精，搖勻，水浴3min，取出待用。用火柴棍沾一滴混合液于載玻片一端，考另一端推進(jìn)制成抹片，干燥，在500—600倍下觀察。(制抹片，在35℃—40下，快速)
2.結(jié)果 活精子頭部不著色，死精子頭部呈紅色，苯胺黑為背景染色，容易辨別，數(shù)200個(gè)或500，，分別數(shù)出活精子和死精子，并計(jì)算。
(四)精子呼吸強(qiáng)度的測定
1.原理 由于精子呼吸消耗精液中的氧，氧耗盡，美藍(lán)退色，美藍(lán)遇氧時(shí)又恢復(fù)其藍(lán)色，其反應(yīng)機(jī)制是由于精子脫氫酶的作用，脫去糖原上的氫原子，在無氧條件下，氫原子與藍(lán)色的甲烯藍(lán)結(jié)合變成甲烯白。因此，實(shí)際上也是測定精子脫氫酶活性的一種方法。其呼吸強(qiáng)度與美蘭退色時(shí)間呈負(fù)相關(guān)。
2.方法 取一滴美蘭與精液于載玻片上，混勻。吸入兩段毛細(xì)管2—3cm，兩段分別
置于37℃、10℃條件下，用計(jì)時(shí)器記錄時(shí)間，并比較、觀察。
(五)精子密度的計(jì)數(shù)檢查
1.將計(jì)數(shù)室推上蓋玻片。推上后立起計(jì)數(shù)板不掉下來為原則，蓋玻片在折光時(shí)可見清晰的彩色條紋。
2.將蓋好蓋玻片的計(jì)數(shù)板置于低倍鏡下觀察，首先要求找到清晰的計(jì)數(shù)室。
3.用移液槍吸取1ml 3%氯化鈉溶液于小試管中，再用移液槍吸出10ul氯化鈉溶液，同時(shí)加入10ul 豬精液，即進(jìn)行一百倍稀釋，搖勻。
4.用吸管吸取稀釋后的精液，并將吸管尖端置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)室和蓋玻片交界處的邊緣上，吸管內(nèi)的精液自動(dòng)滲入計(jì)數(shù)室內(nèi)，使之自然、均勻地分充滿計(jì)數(shù)室。不要溢出和有氣泡，靜放2min。
5.移到高倍鏡下檢查，數(shù)出四角和中央方格中的精子數(shù)，也就是80個(gè)小方格中的精子數(shù)，載物臺(tái)要平置。
6.計(jì)算精子數(shù) 1ml=原精液內(nèi)的精子數(shù)=5個(gè)中央方格數(shù)的精子數(shù)×5×10×1000×稀釋倍數(shù)。
7.吸管用后清洗，步驟：自來水—蒸餾水—95%酒精—乙醚。
8.計(jì)數(shù)板用后清洗，步驟：自來水—蒸餾水—白綢布擦干凈備用。
(六)精子頭部形態(tài)的觀察(威廉氏染色法)
染色程序：
1.先制作精液抹片，要求薄而均勻。然后風(fēng)干或用酒精燈火焰固定。
2.浸入無水酒精中固定2~3 min，取出風(fēng)干。
3.浸入0.5%氯胺T中l(wèi)~2 min。
4.用清水洗1~2 min。
5.迅速通過96%的酒精，風(fēng)干。
6.放人石碳酸復(fù)紅染色液中l(wèi)0~15 min，然后清水中蘸2次。
7.迅速通過美藍(lán)染色液。
8.水洗后風(fēng)干。
經(jīng)此方法染色后，精子頭部呈淡紅色，中段及尾部為暗紅色，頭部輪廓清晰?？稍诟弑剁R或油鏡下觀察200個(gè)精子計(jì)算出各類頭部畸形精子的比例。
畸形精子百分率=畸形精子數(shù)/總精子數(shù)×100%
(七)非精子有形成分的觀察(采用蘇木精—伊紅染色法)
非精子有形成分多為精子形成過程中的某些退化物、生殖上皮的脫落物和血細(xì)胞等。這些成分在精液中出現(xiàn)的比例和類型在一定程度上能反映睪丸和精液排出管道的生理狀態(tài)。在精液中經(jīng)常出現(xiàn)的非精子有形物有白細(xì)胞、紅細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞等。
染色程序：
1. 先制備間斷式的精液抹片(即當(dāng)推制抹片時(shí)，不要一推到底，而要斷續(xù)前推，使抹片厚度有一個(gè)梯度變化，染色后易于觀察不同類型的精子成分)，然后風(fēng)干。
2. 浸入無水酒精中固定3~5 min，風(fēng)干。
3. 分別浸入95%的酒精、75%的酒精和蒸餾水中各1 min。
4. 浸入蘇木精染色液中5 min。
5.浸入伊紅染色液中 l min。
6.沖洗1~3 min。
7.通過70%酒精和無水酒精，風(fēng)干。
8.風(fēng)干后用二甲苯加蓋玻片封存，如不保存可直接觀察。
(八)精子尾部形態(tài)觀察
觀察程序：
1.l ml玻璃管中裝入一些福爾馬林緩沖液，置于37℃恒溫箱中備用。
2.根據(jù)原精液的濃度，向裝有福爾馬林緩沖液的小玻璃管中滴2~5滴精液并混勻。
3.取一滴上述混合液置于載玻片上，加蓋玻片靜止數(shù)分鐘后在400倍的相差顯微鏡下觀察精子尾部形態(tài)。隨機(jī)觀察200個(gè)精子計(jì)算各種尾部畸形精子所占的比例。
畸形精子百分率=畸形精子數(shù)/總精子數(shù)×100%
(九)精子頂體染色觀察
先準(zhǔn)備潔凈的載玻片。用洗滌靈擦洗，清水沖洗，再用蒸餾水漂洗以不掛水珠為凈，烘干或晾干備用。
1.抹片 將需測定的樣品搖勻，取1滴中層精液平滴于載玻片的右端，取一塊蓋玻片，呈35°角自精液滴的左面向右接觸樣品，樣品精液即呈條狀分布在載玻片和蓋玻片接觸的邊緣之間。將上面的蓋玻片貼著平置的載玻片表面，自右向左移動(dòng)，帶著精液均勻地涂抹在載玻片上。切忌直接將精液滴“推”過去，人為造成精子損傷。在制作的抹片背面右端用特種記號(hào)筆編號(hào)。每份精液樣品需同時(shí)制作兩個(gè)抹片。
2. 風(fēng)干 自然風(fēng)干5~20 min。
3. 固定 將風(fēng)干的抹片平置于染色架上，用滴管吸取1 ml固定液滴于抹片上，并使固定液布滿于整個(gè)抹片表面，靜止固定15 min。
4. 水洗 用玻片鑷夾住抹片一端，將固定液棄去倒入染色缸或平皿內(nèi)，在裝有蒸餾水的燒杯中，上下左右搖晃涮洗，夾住松開鑷子幾次，取出抹片于磁盤邊待干。
5. 染色 將固定后的抹片平置于染色架上，用滴管吸取新配制Giemsa染液約2 ml，置于要染的玻片上方平行。自左至右擠出染液于抹片上，使染液均勻布滿在抹片上，靜止染色90 min。
6. 水洗 用鑷子夾住染片，將染片上的染液棄去倒入平皿內(nèi)，再換裝有自來水的燒杯中沖洗，沖洗方法同上。經(jīng)數(shù)次涮洗，直至水洗液無色為止。洗的過程中，若水已變藍(lán)，則可及時(shí)換清水。洗凈后可立于磁盤邊待干。
7. 將精液染片置于顯微鏡下，先用低倍鏡找到精子，再換1 00倍下進(jìn)行油鏡觀察。精子頂體呈紫色，包圍精子頭前部。
根據(jù)精子頂體完整和損傷與否，將精子頂體形態(tài)分為4種類型：
頂體完整型 精子頭部外形正常，著色均勻，頂體完整，邊緣整齊，可見微隆起的頂體嵴，赤道帶清晰。
頂體膨脹型 頂體輕微膨脹，邊緣不整齊，頂體嵴腫脹，核前細(xì)胞膜不明顯或缺損。
頂體破損型 頂體破損，精子質(zhì)膜嚴(yán)重膨脹破損，著色淺且不均勻，頭前部邊緣不整齊。
頂體全脫型 精子頂體全部脫落，精子核裸露。
根據(jù)以上4種類型分別統(tǒng)計(jì)，觀察200個(gè)精子，并計(jì)算出精子頂體完整率。
精子頂體完整率=頂體完整型精子數(shù)/精子總數(shù)×100%
要求2張抹片精子頂體完整率差異不超過15%，求二者平均值。
五、實(shí)習(xí)總結(jié)
通過本次實(shí)習(xí)，對種公豬精液的品質(zhì)檢查內(nèi)容、程序和方法有一定的了解和掌握，同時(shí)對其他家畜的精液品質(zhì)檢查也有一定的認(rèn)識(shí)和了解，這對我們以后從事畜牧生產(chǎn)，尤其在種公畜精液的品質(zhì)檢查有一定的知識(shí)積累，為畜牧生產(chǎn)打下了基礎(chǔ)。
一、目的和要求
1.熟悉人工授精所用的采精和輸精器械，了解其用途及使用方法。
2.練習(xí)安裝假陰道。
二、材料和儀器設(shè)備
(一)采精器材 牛羊豬馬的采精用假陰道，牛羊電刺激采精棒，豬采精用的橡膠手套
(二)輸精器材 牛羊豬馬輸精器，陰道開張器，額燈和手電筒
(三)輔助器材 高壓滅菌器，酒精燈，長柄鉗，鑷子，玻璃棒，溫度計(jì)
(四)藥 品 滅菌凡士林，75%和95%酒精棉球，滑石粉，來蘇兒，洗衣粉
三、方法和步驟
(一)人工授精器材的清洗與消毒
(二)假陰道的安裝調(diào)試
實(shí)驗(yàn)二 精子活率評(píng)定
一、目的和要求
掌握評(píng)定精子活力的方法及評(píng)價(jià)指標(biāo);驗(yàn)證外界因素對精子運(yùn)動(dòng)及生存能力的影響;。
二、材料和儀器
(一)精液 牛、羊、豬等任一種動(dòng)物的精液
(二)器械 顯微鏡，顯微鏡保溫箱(或顯微鏡恒溫臺(tái))，載玻片，蓋玻片，搪瓷盤，溫度計(jì)，滴管，擦鏡紙，紗布，有刻度試管，計(jì)數(shù)器
(三)藥品 5%伊紅
三、內(nèi)容和方法
(一)精液的肉眼檢查
(二)評(píng)定精子的活率
(三)外界因素對精子活率的影響
實(shí)驗(yàn)三 精子密度測定
一、目的和要求
掌握檢查精子密度的幾種方法。要求學(xué)生熟練掌握血細(xì)胞計(jì)數(shù)方法。
二、材料和儀器
(一)材料 牛精液、豬精液
(二)器材 顯微鏡，血吸管，紅細(xì)胞和白細(xì)胞吸管，血細(xì)胞計(jì)數(shù)室，載玻片，蓋玻片，200 μl槍頭，細(xì)乳膠管，5 ml試管，1 ml 移液槍及槍頭
(三)藥品 3%氯化鈉，乙醚，95%乙醇，去離子水
三、內(nèi)容和步驟
(一)目測法
(二)計(jì)數(shù)法
實(shí)驗(yàn)四 精子畸形率的測定
一、目的和要求
掌握精子畸形率的測定方法。
二、材料和器械
(一)材料 牛、羊、豬或兔等任何一種家畜的新鮮精液或冷凍精液
(二)器械 高倍顯微鏡，計(jì)數(shù)器，載玻片，蓋玻片
三、內(nèi)容和步驟
1、制作精液抹片。
2、浸入無水酒精中固定2~3 min，取出風(fēng)干。
3、放人石碳酸復(fù)紅染色液中l(wèi)0~15 min，然后清水中蘸2次。
4、迅速通過美藍(lán)染色液。
5、水洗后風(fēng)干
6、在高倍鏡或油鏡下觀察200個(gè)精子計(jì)算出各類頭部畸形精子的比例。
實(shí)驗(yàn)五 稀釋液配制及精液稀釋
一、目的和要求
掌握稀釋液配制的基本程序和操作方法及稀釋精液的方法。
二、材料和器械
(一)材料 雞蛋、原精液
(二)器材 250ml三角瓶，250ml燒杯，100ml量筒，感量為0.1克的天平，玻璃漏斗，電爐，石棉網(wǎng)，玻璃棒，定性濾紙，消毒紙巾，硫酸紙，滅菌牛皮紙，橡皮筋，10 ml一次性注射器，1 ml注射器，5 ml注射器，75%酒精棉球
(三)藥品 葡萄糖，檸檬酸鈉，青霉素，鏈霉素
三、內(nèi)容和步驟
(一)玻璃用品的清洗與消毒
(二)天平的標(biāo)準(zhǔn)
(三)稱量藥品
(四)溶液配制
實(shí)驗(yàn)六 兔的超數(shù)排卵
一、目的和要求
了解主要促性腺激素的作用。初步掌握沖卵和檢卵技術(shù)。
二、材料和器械
(一)動(dòng)物 4只供體母兔， 2只公兔
(二)器具 玻璃注射器，兔用手術(shù)臺(tái)，實(shí)體顯微鏡、手術(shù)刀
(三)藥品 FSH，PMSG，HCG，75%酒精，沖卵液
三、內(nèi)容和步驟
(一)供體兔超數(shù)排卵處理
1.FSH處理 2.PMSG處理
3.對照組處理
(二)手術(shù)沖胚方法
(三)早期胚胎觀察
實(shí)習(xí)七 母畜的發(fā)情鑒定
一、目的和要求
1.掌握母畜發(fā)情鑒定的各種方法，判斷輸精或配種時(shí)間。
2.掌握牛直腸檢查的基本操作方法。
二、材料和器械
(一)材料 母畜(牛、羊、豬)、試情公畜
(二)用具 六柱欄或保定架，開腔器，手電筒，臉盆，毛巾，肥皂，長臂手套
(三)藥品 凡士林，70%酒精，消毒液
三、方法和步驟
(一)外部觀察法
(二)試情法
(三)陰道檢查法
(四)直腸檢查法
實(shí)習(xí)八 輸 精
一、目的和要求
了解各種家畜的輸精過程，掌握家畜的輸精操作方法。
二、材料和器械
(一)材料 發(fā)情的母牛、精液
(二)用具 保定架，滅菌的輸精器(金屬或玻璃)，卡蘇槍，臉盆，肥皂，長臂手套
(三)藥品 75%酒精棉球
三、方法和步驟
(一)輸精前的準(zhǔn)備
(二)各種家畜的輸精
實(shí)習(xí)九 種雞的采精和輸精
一、目的和要求
通過實(shí)習(xí)，初步掌握公雞的按摩采精和母雞的輸精操作技術(shù)。
二、材料和器械
(一)材料 公雞、產(chǎn)蛋母雞各8只
(二)用具 剪毛剪，集精杯，輸精器，顯微鏡，紗布，保溫瓶
(三)藥品 稀釋液
三、方法和步驟
(一)公雞的按摩采精
(二)精液品質(zhì)檢查